目的
為生化指標(biāo)檢測(cè)中動(dòng)物組織樣本的采集、儲(chǔ)存等操作提供參考。
適用范圍
適用于酶活及含量動(dòng)物組織的采集及儲(chǔ)存。
操作流程：
1. 材料準(zhǔn)備
材料 | 型號(hào)或級(jí)別 |
實(shí)驗(yàn)服、手套、口罩等防護(hù)設(shè)施 | 醫(yī)用級(jí) |
手術(shù)器械 | 醫(yī)用級(jí) |
凍存管 | 建議使用無(wú)菌級(jí)管 |
記號(hào)筆 | 務(wù)必使用油性記號(hào)筆 |
液氮 | |
冰箱 | -80℃ |
2. 采集 切割下目標(biāo)組織樣本，用生理鹽水清洗殘留血液，濾紙吸干表面液體；
3. 剪碎 在冰上將組織樣本切割成 20~50 mg 左右的小塊，根據(jù)組織樣本類型適當(dāng)調(diào)整；
4. 速凍 采用鋁箔紙包括組織塊，置于液氮中速凍約10s，根據(jù)組織塊的大小做適當(dāng)調(diào)整，在組織切除和處理30 min內(nèi)進(jìn)行速凍；
5. 分裝 將速凍后的組織塊分裝至凍存管中，做好標(biāo)記；
6. 儲(chǔ)存 速凍后的組織轉(zhuǎn)運(yùn)儲(chǔ)存于液氮或-80℃冰箱中。
樣本量要求
組織樣本需≥200 mg/指標(biāo)。
儲(chǔ)存及運(yùn)輸
樣本應(yīng)儲(chǔ)存于液氮或-80℃冰箱中。運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)全程保持低溫，建議使用干冰冷凍運(yùn)輸。
注意事項(xiàng)
1. 材料 手術(shù)器械、容器等材料必須保持潔凈，避免污染；
2. 代表性 取樣需要具有代表性，且取樣部位應(yīng)一致；
3. 快速原則 由于代謝物在體內(nèi)代謝速度快，請(qǐng)務(wù)必提前設(shè)計(jì)準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)和材料，快速取樣和預(yù)處理；
4. 低溫原則 在采集、處理及運(yùn)輸過(guò)程中，請(qǐng)全程保持低溫；
5. 一致性原則 在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和取樣的過(guò)程中，保持一致性。
a)設(shè)計(jì)一致性，不同樣品除了需研究的內(nèi)容不一致，其它都保持一致，尤其是取樣部位；
b)時(shí)間一致性，采樣時(shí)間應(yīng)控制在同一時(shí)間范圍內(nèi)；
c)預(yù)處理一致性，即所有樣品的預(yù)處理方法、試劑等均保持一致；
6. 動(dòng)物樣本若需要使用麻醉劑，建議使用異氟醚；
7. 要避免血液污染，采用去離子水或等滲溶液漂洗干凈；
8. 大塊組織需要切成小塊，方便儲(chǔ)存和取樣；
9. 避免反復(fù)凍融；
10. 樣本編號(hào)一定要清楚、牢固，防止在冷凍過(guò)程中編號(hào)丟失。